寬分子量非變性電泳蛋白質(zhì)Marker
II（21-880 kD）
Broad MW Native
Electrophoresis Protein Marker II（21-880 kD）
|
名稱
|
貨號
|
規(guī)格
|
|
寬分子量非變性電泳蛋白質(zhì)Marker II（21-880
kD）
|
RTD6136
|
20次（100
μl）
|
●儲存、運(yùn)輸及效期：
-20℃保存，濕冰運(yùn)輸，有效期為12個(gè)月。
● 產(chǎn)品簡介：
本產(chǎn)品有5種蛋白組成，分子量范圍為21-880
kD，經(jīng)過非變性電泳后，用考馬斯亮藍(lán)染色后可以得到6條主帶。
|
蛋白名稱
|
分子量(kD)
|
蛋白來源
|
pI
|
說明
|
|
Ferritin
|
440
880
|
equine
spleen
|
N/A
|
非變性下440kD和880
kD
|
|
RC2
|
200
|
重組蛋白
|
6.7
|
單體蛋白分子量為75
kD，在Tris-甘氨酸非變性下表現(xiàn)為分子量~200
kD
|
|
RC1
|
75
|
重組蛋白
|
5.9
|
單體蛋白分子量為75 kD，在Tris-甘氨酸非變性下表現(xiàn)為分子量~75 kD，同時(shí)會形成少量二聚體（dimer）
|
|
Ovalbumin
|
45
|
egg
white
|
5.2
|
球蛋白，分子量為45kD，非變性條件下大于45 kD會出現(xiàn)電荷異構(gòu)體（charge
isomer）
|
|
Trypsin
Inhibitor
|
21
|
Soybean
|
4.5
|
非變性下21 kD
|
● 使用說明：
1. 取出產(chǎn)品后，常溫融化后，徹底混勻，上樣電泳。
注：上樣量根據(jù)膠的厚度和梳子的寬度確定。一般說來，1.0厚度10齒梳子加樣孔上樣5 μl，1.0厚度15齒梳子加樣孔上樣量2.5 μl，其他規(guī)格梳子請適當(dāng)調(diào)整上樣量。
2. 該產(chǎn)品不含蛋白凝膠制備試劑，您可以選擇非變性PAGE凝膠制備及電泳試劑盒（貨號：
RTD6130或RTD6135）。如自備試劑，經(jīng)典Laemmli系統(tǒng)中把制膠溶液、電泳緩沖液和上樣緩沖液中的SDS和還原劑（DTT或β-巰基乙醇）全部去除即可進(jìn)行非變性電泳。
3. 電泳條件：
建議使用10%非變性膠或者4-15%梯度非變性膠（貨號：RTD6117-0415）進(jìn)行電泳。
|
恒電壓
|
120 V
|
|
起始電流
|
27-35 mA/板膠
|
|
結(jié)束電流
|
7-10 mA/板膠
|
|
電泳時(shí)間
|
1h20min+
|
4. 電泳結(jié)束后，考馬斯亮藍(lán)染色，觀察結(jié)果。
注：使用銀染染色時(shí)，由于靈敏度高于考馬斯亮藍(lán)染色方法，需要適當(dāng)降低Marker上樣量，一般稀釋50倍后上樣。
注意：
1. 本蛋白Marker不適用于變性蛋白電泳（SDS-PAGE），因?yàn)樵?span>SDS存在下，含有多個(gè)亞單位的蛋白會不同程度解聚。
2. 在非變性條件下，蛋白的遷移與蛋白的電荷、蛋白形狀以及蛋白分子量都有關(guān)，因此不能精確判斷待測蛋白的分子量，只能粗略判斷蛋白的大小。
● 實(shí)驗(yàn)示例：
1. 4-15%Tris-甘氨酸非變性膠
2. 8%Tris-甘氨酸非變性膠
|
3. 3-12% BlueNative
4. 4-16% BlueNative
|
|
|